作者：张珊文/徐刚/徐博来源：《中华放射肿瘤学杂质》2009年5月
【摘要】目的 探讨直肠癌肿瘤组织内术前放疗后浸润淋巴细胞(TIL)数量改变对预后的影响。方法 搜集近8年余接受30Gy分10次12d完成的术前放疗的直肠癌患者107例,分析TIL分级与术前放疗后病理消退程度及预后关系。结果 直肠癌放疗前TIL1级75例,2级16例,3级16例,4级0例,术前放疗后TIL1级19例,2级43例,3级35例,4级10例。放疗后病理消退分级1级36例,2级57例,3级14例。单因素分析发现放疗前及放疗后TIL对局部病理消退影响有统计学意义(X2=36.80,P<0.01;X2=14.00,P<0.01);术前放疗后癌巢内TIL及病理消退对预后影响著(X2=24.00,P<0.01;X2=12.17,P<0.01)。 Logistic多元分析提示放疗后TIL与病理消退关系密切(X2=8.05,P<0.01)。结论 放疗前及放疗后TIL与直肠癌术前放疗局部病理消退相关。直肠癌术前放疗后癌巢TIT是影响生存预后的因素之一。
【关键词】直肠肿瘤 放射疗法 术前放疗 预后
Tumor-Ininultrating lymphocytes predict efficacy of preoperative radiotherapy for rectal cancer.XU Gang, ZHANG Shan-wen, XU Bo. Department of Radiation Oncology, Peking University School of Oncology，Beiing Cancer Hospital& Institute, Beying 100036, China Corresponding author：XU BO.
【Abstract】 Objective To evaluate the effect of tumor infiltrating lymphocyte(TIL) on prognosis of rectal cancer treated with preoperative radiotherapy. Methods From Jan. 1999 to Oct. 2007, 107 patientswith rectal cancer were treated with preoperative radiotherapy of 30 Gy/10f/12 days. The relationships a-mong TIL, pathologic regression and prognosis were analyzed. Results Before radiotherapy, TIL in rectalcencer was 75 patients(70. 1% )in grade 1, 16(15.0%)in grade 2 and 16(15.0%)in grade 3;While after radiotherapy,i t changed to 19(17.7%)in grade 1, 43(40.2%)in grade 2, 35(32. 7%)in grade3 and 10(9. 3%)in grade 4. After radiotherapy, pathologic regression was 36(33. 6%) in grade 1, 57 (53. 3%)in grade 2 and 14(13. 1%)in grade 3. Univariate analysis showed that TIL both before and after adiotherapy was the significant prognostic factor for local pathologic regression(X2=36.80, P<0.01:X2=14.00, P<0.01). Kaplan Meier survival analysis showed that TIL, and pathologic regression after radiother-apy were significant associated with the survival(X2 =24.00, P<0. 01; X2=12. 17, P<0.01).Logistic re-gression showed that TIL after radiotherapy had a significant effect on local pathologic regression(X2=8.05,P<0.01).Conclusions For rectal cancer treated with preoperative radiotherapy, TIL before and after ra-diotherapy is significantly related with local pathologic regression, and TIL after radiotherapy is a prognostic factor.
【Key words】 Rectal cancer ;radiotherapy;Preoperative radiotherapy; Prognosis.
直肠癌术前放疗后病理消退影响因素众多,但直肠癌术前放疗前后瘤体内肿瘤浸润淋巴细胞( tumor infiltrating lymphocyte,TIL)数量分级改变与放疗后病理消退的关系尚未明确[1-6]。为了解TIL浸润程度对直肠癌预后的影响,笔者进行了研究。
材料与方法
1.一般临床资料:从1999年1月到2007年8月行直肠癌单纯术前放疗患者107例入组研究。其中男61例,女46例;年龄27~86岁,中位值57岁。根据腔内B超和盆腔MR确定临床TNM分期T1期0例，T2期2例，T3期32例,T4期73例;N0期8例,N1期22例,N2期77例;M0期106例,M1期1例。107例患者放疗前 Dukes分期,A期占0%,B期占7.5%,C期占91.5%,D期0.9%。所有患者放疗前后均有病理标本,术后病理为黏液腺癌13例,印戒细胞癌2例,高分化腺癌10例,中分化腺癌70例,低分化腺癌12例。放疗前肿瘤浸润肠周比例1/4周10例,2/4周38例,3/4周18例,4/4周41例。肿瘤下缘距肛口距离平均为5cm,放疗前肿瘤浸润长度中位数5cm(1~11cm)。
2.研究方法:模拟定位机下定位,采用西门子10 MV X线加速器,一后、两侧野放疗。侧野加30°楔形板,30Gy分10次12d放疗后两周手术。根据肿瘤下缘距肛门距离,由外科决定手术方式,均采用全系膜切除。收集107例直肠癌术前放疗前、后临床病理资料,观察对比自身放疗前后癌巢内淋巴细胞浸润情况。
3.放疗后病理改变分级:参考 Wheeler等[7]和肿瘤病理学图谱[8],放疗后病理消退分级从轻到重分1-3级:1级为病理无变化或轻度变化,癌呈多形性,有核分裂相,可见散在退化的变性癌细胞,癌巢处于增殖;2级为大部分癌细胞肿胀,胞浆空泡形成,核固缩,有灶性坏死,无核分裂相,癌巢变性为主;3级为癌细胞破碎消失。
4.癌巢TIL分级:低倍镜浏览,了解肿瘤浸润淋巴细胞均匀性;然后在光镜400倍镜下取5个视野,用数码图像采集器、显微镜测微尺进行计数,并以细胞个数/mm2为单位,取平均值,划分等级:<25个淋巴细胞mm2为1级,25~50个淋巴细胞/mm2为2级,50~75个淋巴细胞mm2为3级,>75个淋巴细胞/mm2为4级。病理组织切片由同一组病理专科医生2-3人观察分级。
5.统计方法:用SPSS15.0软件对计数资料的单因素分析行X2检验,TIL及其他术前因素对局部病理消退的影响行非条件 Logisti多因素分析。
结果
1.随访情况:截止2007年8月中位随访期21个月(2~86个月),随访率为100%。
2.放疗前后 Dukes分期变化:A、B、C、D期放疗前分别占0%、7.5%、91.5%、0.9%,术后分别占11.2%、60.7%、26.2%0.9%。
3.放疗前TIL分级对局部病理消退的影响:结果显示放疗前TIL对局部病理消退有影响,详见表1。
4.放疗后TIL对局部病理消退的影响:结果提示放疗后手术切除标本中TIL分级能预测局部疗效,详见表2。
5.影响直肠癌局部病理消退的多因素分析:选择有临床意义的术前因素进人多因素分析,其中放疗后淋巴细胞浸润是独立影响局部病理消退的因素,详见表3。
6.TIL与生存预后的关系:全组1、2、3年生存率分别为94.6%、91.6%、83.4%。单因素分析显示直肠癌术前放疗前对TIL生存预后无影响(X2=4.57,P>0.05),而术前放疗后癌巢内TIL对生存预后有影响(X2=24.00.P<0.01);放疗后癌巢内TIL为生存预后良好的因素之一,直肠癌术前放疔后癌巢内TIL分级不同生存预后不同(图1)。
7.放疗后病理消退分级对直肠癌术前放疗患者生存预后的影响:单因素分析显示直肠癌术前放疗后病理消退分级对生存预后有影响(X2=12.17,P<0.01),放疗后病理退化程度重预后好(图2)。
讨论
病理消退分级是局部放疗判断疗效的标准,肿瘤浸润淋巴细胞是存在于肿瘤瘤内以及肿瘤间质内的T细胞为主的淋巴细胞群体，目前研究结果就肿瘤淋巴细胞浸润与病理消退及预后的关系无明确结论[1-6]。2006年 Jerome等[3]在科学杂志报道浸润到直肠癌的免疫细胞种类、密度及分布与预后相关。Hano[4]、 Atreya和 Neurath[5]、 Shunyakov等[9]赞同TIL存在是预后较好的因素。笔者的研究结果显示放疗前后TIL与局部病理消退关系密切,放疗前后淋巴细胞明显浸润的病例,肿瘤局部消退明显,Logistic多元回归分析证实放疗后TIL是影响局部病理消退的独立预后因素。另外,笔者研究结果还显示放疗后TIL浸润数量多,病理消退明显组生存率较高;单因素分析结果提示放疗后癌巢内TIL以及放疗后病理消退与预后有关,为生存预后有利因素之一。与文献[10]报道结论相近。关于TIL对直肠癌术前放疗后患者生存预后的影响,Hamo[4]提出淋巴细胞反应是直肠癌独立预后因素,TIL是直肠癌预后的有利因素。文献[12-14]报道从病理切片中观察到肿瘤的癌周和癌组织内的淋巴细胞浸润与患者预后有密切关系,淋巴细胞反应较强的往往预后较好。Jass等[14]报道直肠癌单纯术后检查淋巴细胞浸润强阳、中度、无浸润的5年生存率分别为92%、65%和36%,提示浸润多则生存率高;多因素分析显示淋巴细胞浸润与分级分期相关,表明淋巴细胞在癌周及癌组织内浸润强弱与患者预后正相关。
总之,关于肿瘤内TIL浸润的细胞类型及对预后影响机制以及放疗后不同时期TIL数值变化等诸多问题尚需进一步研究。
参考文献
[1] Murray D, Hreno A, Dutton J, et al. Prognosis in colon cancer: a Pathologic reassessment. Arch Surg, 1975, 110: 908-913.
[2] Kristen MD, Henry TL. Tumor infiltration lymphocytes( TIs ):lessons leamed in 30 years of study. Clinical and applied immu-nology review8,2005,5:149-166.
[3]Jerome G, Anne C, Fatima SC, et al. Type, density, and location of immune cells within human colorectal tumors predict clinical out-come. Science,2006,313:1960-1963.
[4] Haruo O. Focus on TILs: prognostic significance of tumor infiltra-ting lymphocytes in human colorectal cancer. Cancer Immunity,2007,7:19.
[5] Atreya I, Neurath MF. Immune cells in colorectal cancer: prognos-tie relevance and therapeutic strategies. Expert Rev Anticancer T-her,2008,8:561-572.
[6]Grabenbauer GG, Lahmer G, Distel L, et al. tumor-infiltrating cyto-toxic T cells but not regulatory T cells predict outcome in anal squamous cell carcinoma. Clinical Cancer Res. 2006. 12: 3355-3360.
[7] Wheeler JMD, Warren BF, Mortensen NJM, et al. Quantification of histologic regression of rectal cancer after irradiation. Dis Colon Rectum,2002,45:1051-1056.
[8]中国医学科学院肿瘤医院病理科.肿瘤病理学图谱.北京:人民卫生出版社,1975:42.
[9]Shunyakov L. Ryan CK, Sahusrabudhe DM, et al. The influence of host response on colorectal cancer prognosis. Clin Colorectal Canc-er,2004,4:38-45.
[10]刘建东,杜同海,才又红,等.局部晚期低位直肠癌术前放化疗的降期效果和加前切除的远期疗效中华放射肿瘤学杂志,2005,14:298-232.
[11]朴常福,谢遵江,刘颖,等.人直肠癌组织中肿瘤浸润淋巴细胞的形态学观察中国误诊学杂志,2007,4:988-989.
[12] Morita M, Kuwano H, Araki K, et al. Prognostic significance of lymphocyte infiltration following preoperative chemoradiotherapy and hyperthermia for esophageal eancer. Int J Radiat Oncol Biol Phys,2001,49:1259-1266.
[13]林震琼癌周淋巴细胞反应对肺癌术后生存期的影响肿瘤防治究,1983,10:48.
[14]Jass JR, Ajioka Y. Allen JP, et al. Assessment of invasive growth pattern and lymphocytic infiltration in colorectal cancer. Histopa-thology,1996,6:543548.(收稿日期:2008-02-18)
